产品货号：
KM0155
中文名称：
Hoechst33258
英文名称：
4-[5-(4-Methyl-1-piperazinyl)[2,5'-bi-1H-benzimidazol]-2'-yl]-phenol.trihydrochloride; bisBenzimide
产品规格：
10mg|100mg
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本品以Hoechst 33258粉末形式提供，溶于水，溶解度可达10mg/ml。用于细胞核染色，推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。
Hoechst 33258是一种通过荧光显微镜和流式细胞仪进行DNA检测的蓝色荧光探针。Hoechst 33258可用于活细胞或固定细胞，也适用于流式细胞术对细胞周期的分析和DNA浓缩的监测。虽然Hoechst 33258比其他衍生物（如Hoechst 33342）的细胞膜渗透性差些，但其能通过绘制发射光强度与DNA含量的标准曲线来定量测量DNA含量。Hoechst 33258的最大激发波长是346nm，最大发射波长为460nm；与双链DNA结合后的最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
主要参数：
CAS NO：23491-45-4
分子式：C25H24N6O·3HCl
分子量：533.88
纯度：≥95%
外观：黄色至深黄色粉末
溶解性：溶于水（10 mg/ml）
Ex/Em：346/460 nm；352/461 nm（Hoechst 33258-DNA）；
结构式：
保存：-20℃避光干燥保存，3年有效。
使用方法：
一、储存液配制
用双蒸水溶解，溶解度高达10mg/ml，根据实际情况配制所需浓度的储存液如5mg/ml。储存液2-8oC避光保存，至少1个月有效。
注意：本品用磷酸盐缓冲液溶解会出现沉淀。
二、工作液配制
用双蒸水或PBS稀释母液，配制成所需要的工作浓度（0.5-10μg/ml）。
三、固定的细胞或组织染色
对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。Hoechst 33258染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行Hoechst 33258染色。
1．对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5min。
2．吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5min。
3．直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=352/461nm。
四、活的细胞或组织染色
1．细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。对于六孔板，一个孔通常需加入1ml染色液；对于96孔板，一个孔通常需加入100μl染色液。
2．在37℃培养细胞10～20min。
3．用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
4．直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=352/461nm。
注意事项：
1．Hoechst 33258对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2．荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3．为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液（Fluoromount-GTM抗荧光淬灭封片剂（水溶性），货号：KM0182）。
4．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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Hoechst 33258是一种通过荧光显微镜和流式细胞仪进行DNA检测的蓝色荧光探针。Hoechst 33258可用于活细胞或固定细胞，也适用于流式细胞术对细胞周期的分析和DNA浓缩的监测。虽然Hoechst 33258比其他衍生物（如Hoechst 33342）的细胞膜渗透性差些，但其能通过绘制发射光强度与DNA含量的标准曲线来定量测量DNA含量。Hoechst 33258的最大激发波长是346nm，最大发射波长为460nm；与双链DNA结合后的最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
主要参数：
CAS NO：23491-45-4
分子式：C25H24N6O·3HCl
分子量：533.88
纯度：≥95%
外观：黄色至深黄色粉末
溶解性：溶于水（10 mg/ml）
Ex/Em：346/460 nm；352/461 nm（Hoechst 33258-DNA）；
结构式：
保存：-20℃避光干燥保存，3年有效。
使用方法：
一、储存液配制
用双蒸水溶解，溶解度高达10mg/ml，根据实际情况配制所需浓度的储存液如5mg/ml。储存液2-8oC避光保存，至少1个月有效。
注意：本品用磷酸盐缓冲液溶解会出现沉淀。
二、工作液配制
用双蒸水或PBS稀释母液，配制成所需要的工作浓度（0.5-10μg/ml）。
三、固定的细胞或组织染色
对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。Hoechst 33258染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行Hoechst 33258染色。
1．对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5min。
2．吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5min。
3．直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=352/461nm。
四、活的细胞或组织染色
1．细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。对于六孔板，一个孔通常需加入1ml染色液；对于96孔板，一个孔通常需加入100μl染色液。
2．在37℃培养细胞10～20min。
3．用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
4．直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=352/461nm。
注意事项：
1．Hoechst 33258对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2．荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3．为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液（Fluoromount-GTM抗荧光淬灭封片剂（水溶性），货号：KM0182）。
4．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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